Paghahanda ng Agarose Gel Para sa Electrophoresis

Paghahanda ng Agarose Gel para sa Electrophoresis

Tandaan: Palaging magsuot ng disposable gloves!

Hakbang-hakbang na Mga Tagubilin

Pagtimbang ng Agarose Powder:use weighing paper at isang elektronikong balanse upang sukatin ang 0.3g ng agarose powder (batay sa isang 30ml system).

Paghahanda ng TBST Buffer:payusin ang 30ml ng 1x TBST buffer sa isang 100ml Erlenmeyer flask.

Pag-dissolve ng Agarose Powder:pang agarose powder sa buffer ng TBST at iling mabuti.Ilagay silasa microwave at init (karaniwang sa loob ng 50 segundo, na natatakpan ng aluminum foil) hanggang sa ganap na matunaw.

Paglamig at Pagdaragdag ng Nuclease:use guwantes upang alisin ang pinaghalong mula sa microwave at hayaan itong lumamig nang bahagya sa malamig na tubig hanggang sa ito ay mainit-init (humigit-kumulang 60°C). Magdagdag ng 2µl ng nuclease (Eb substitute) habang nanginginig upang maihalo nang maigi.

Paghahanda ng Gel Mould:

• Csandalan at tuyo anggel tray at gel casting deviceng tangke ng electrophoresis.
•  Ppuntas ang geltraysa panloob na tangke at ipasok ang suklay sa isang nakapirming posisyon.
• Paghaluin ang solusyon ng agarose gel, pinalamig sa humigit-kumulang 65°C, at maingat na ibuhos ito satray ng gelsagel casting device, dahan-dahan itong ikinakalat hanggang sa ito ay makabuo ng pantay na layer ng gel sa glass plate.
• Pahintulutan itong umupo sa temperatura ng silid hanggang sa ganap na tumigas ang gel.
• Dahan-dahang alisin ang suklay patayo at alisin ang tape.
• Ilagay ang geltraysa tangke ng electrophoresis.

Mahalaga: Tiyaking walang bula ng hangin sa bahagi ng mga ngipin ng suklay. Ang ibabaw ng likido ay dapat na makinis na walang ripples.

Pagpapatakbo ng Gel

Nilo-load ang Gel

Pagkatapos na tumigas ang gel, ilagay ito sa tangke ng electrophoresis at ibuhos ang buffer ng electrophoresis hanggang sa lumubog ang gel.

Paghahanda ng mga Sample

• Kunin ang marker at loading buffer mula sa refrigerator.
• Magdagdag ng 6µl ng loading buffer sa mga sample at haluing mabuti.
• Gamit ang micropipette, dahan-dahang i-load ang mga sample sa malalaking balon ng gel (mag-ingat na huwag mabutas ang gel at huwag ibuhos ang buong volume para maiwasan ang mga bula ng hangin).
• I-load ang marker sa alinman sa maliliit na balon (tandaan ang posisyon nito).

Pagsisimula ng Electrophoresis

• Takpan ang tangke ng electrophoresis at simulan kaagad ang electrophoresis pagkatapos i-load ang gel.
• Itakda ang boltahe sa 60-100V. Ang mga sample ay lilipat mula sa negatibong elektrod (itim) patungo sa positibong elektrod (pula).
• Ang mas mataas na boltahe ay nagpapaikli sa epektibong hanay ng paghihiwalay ng agarose gel.
• Itigil ang electrophoresis kapag ang bromophenol blue dye ay umabot ng humigit-kumulang 1cm mula sa ilalim na gilid ng gel plate.

Pagmamasid sa mga Resulta

Pagkatapos paghiwalayin ang mga banda, itigil ang electrophoresis, kunin ang gel, at direktang tuklasin at kunan ng larawan ito.

Gumamit ng gel imaging system para kunan ng larawan at pagmasdan ang mga banda (suriin kung mayroong anumang mga banda para sa marker o mga sample).

Pagkatapos makuha ang iyong gel band map, hanapin ang marker. Batay sa marker, matutukoy mo ang mga target na banda!

Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ay ginawang mga produktong electrophoresis nang higit sa 50 taon. Ipinakita namin ang aming mga horizontal electrophoresis system dito para saagarose gelelectrophoresis.Pumilipahalang na mga sistema ng electrophoresismula sa Beijing liuyi para sa iyong eksperimento sa gel electrophoresis upang matulungan ang iyong pananaliksik sa industriya ng biotechnology.

Nag-aalok kami ng iba't ibang modelo ng mga horizontal electrophoresis tank para sa paghahagis at pagpapatakbo ng maliitagarosemalalaking gelsagarosemga gel

Gabay sa Pagpili para sa Horizontal Immersed Gel Electrophoresis Unit

Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ay dalubhasa sa pagmamanupaktura ng mga instrumento ng electrophoresis sa loob ng higit sa 50 taon gamit ang aming sariling propesyonal na teknikal na koponan at R&D center. Mayroon kaming maaasahan at kumpletong linya ng produksyon mula sa disenyo hanggang sa inspeksyon, at bodega, pati na rin ang suporta sa marketing. Ang aming mga pangunahing produkto ay Electrophoresis Cell (tangke/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System atbp. Nagbibigay din kami ng mga instrumento sa lab tulad ng PCR instrument, vortex mixer at centrifuge para sa laboratoryo.

Kung mayroon kang anumang plano sa pagbili para sa aming mga produkto, mangyaring huwag mag-atubiling makipag-ugnayan sa amin. Maaari kang magpadala sa amin ng mensahe sa email[email protected]o[email protected], o mangyaring tawagan kami sa +86 15810650221 o idagdag ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.

Mangyaring I-scan ang QR code upang idagdag sa Whatsapp o WeChat.