Panimula
Ang gel electrophoresis ay isang pangunahing pamamaraan sa molecular biology, na malawakang ginagamit para sa paghihiwalay ng mga protina, nucleic acid, at iba pang macromolecules. Ang wastong kontrol sa dami ng sample, boltahe, at oras ng electrophoresis ay mahalaga para sa pagkamit ng tumpak at maaaring kopyahin na mga resulta.Nag-aalok ang aming kasamahan sa labpinakamahusay na kasanayan para sa pamamahala ng mga parameter na ito sa panahon ng SDS-PAGE gel electrophoresis.
Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis mga produkto
Sample na Dami: Tinitiyak ang Consistency
Kapag nagsasagawa ng SDS-PAGE electrophoresis, ang dami ng sample ay isang pangunahing salik na maaaring makabuluhang makaapekto sa paglutas ng iyong mga resulta. Karaniwang inirerekomenda na mag-load ng 10 µL ng kabuuang protina bawat balon. Para matiyak ang pare-pareho at maiwasan ang sample diffusion sa pagitan ng mga katabing balon, mahalagang magkarga ng pantay na dami ng 1x loading buffer sa anumang walang laman na balon. Ang pag-iingat na ito ay nakakatulong upang maiwasan ang pagkalat ng mga sample sa mga kalapit na daanan, na maaaring mangyari kung ang balon ay iiwang walang laman.
Bago i-load ang iyong mga sample, palaging magsimula sa pamamagitan ng pagdaragdag ng molecular weight marker sa isang balon. Ito ay nagbibigay-daan para sa madaling pagkilala ng mga laki ng protina pagkatapos ng electrophoresis.
Kontrol ng Boltahe: Pagbalanse ng Bilis at Resolusyon
Ang boltahe na inilapat sa panahon ng electrophoresis ay direktang nakakaapekto sa parehong bilis kung saan ang mga sample ay lumipat sa pamamagitan ng gel at ang resolusyon ng paghihiwalay. Para sa SDS-PAGE, ipinapayong magsimula sa mababang boltahe sa paligid ng 80V. Ang paunang mababang boltahe na ito ay nagbibigay-daan sa mga sample na lumipat nang dahan-dahan at pantay-pantay, na nakatuon ang mga ito sa isang matalim na banda habang pumapasok sila sa separating gel.
Kapag ang mga sample ay ganap na nakapasok sa separating gel, ang boltahe ay maaaring tumaas sa 120V. Ang mas mataas na boltahe na ito ay nagpapabilis sa paglipat, na tinitiyak na ang mga protina ay mahusay na pinaghihiwalay ayon sa kanilang molekular na timbang. Mahalagang subaybayan ang progreso ng bromophenol blue dye front, na nagpapahiwatig ng pagkumpleto ng electrophoresis. Para sa mga gel na may konsentrasyon na 10-12%, 80-90 minuto ay karaniwang sapat; gayunpaman, para sa 15% gels, maaaring kailanganin mong pahabain nang bahagya ang oras ng pagtakbo.
Pamamahala ng Oras: Pag-alam Kung Kailan Hihinto
Ang timing ay isa pang kritikal na kadahilanan sa gel electrophoresis. Ang pagpapatakbo ng gel para sa masyadong mahaba o masyadong maikli ng isang panahon ay maaaring humantong sa suboptimal paghihiwalay. Ang paglipat ng bromophenol blue dye ay isang kapaki-pakinabang na tagapagpahiwatig: kapag umabot ito sa ilalim ng gel, kadalasan ay oras na upang ihinto ang pagtakbo. Para sa mga karaniwang gel, tulad ng 10-12%, ang tagal ng electrophoresis na humigit-kumulang 80-90 minuto ay karaniwang sapat. Para sa mas mataas na porsyento ng mga gel, tulad ng 15%, ang oras ng pagtakbo ay dapat na pahabain upang matiyak ang kumpletong paghihiwalay ng mga protina.
Pamamahala ng Buffer: Muling Paggamit at Paghahanda ng mga Buffer
Ang Electrophoresis buffer ay maaaring magamit muli ng 1-2 beses, depende sa mga partikular na kondisyon ng iyong laboratoryo. Gayunpaman, para sa pinakamainam na resulta, inirerekumenda na maghanda ng sariwang 10x buffer at palabnawin ito bago gamitin. Tinitiyak nito na ang buffer ay nagpapanatili ng pagiging epektibo nito, na humahantong sa mas maaasahang mga resulta ng electrophoresis.
Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis mga produkto
Sa pamamagitan ng maingat na pagkontrol sa dami ng sample, boltahe, at oras ng electrophoresis, maaari mong makabuluhang mapabuti ang katumpakan at muling paggawa ng iyong mga resulta ng gel electrophoresis. Ang pagpapatupad ng pinakamahuhusay na kagawiang ito sa iyong gawain sa laboratoryo ay makakatulong sa iyong makamit ang mas malinaw at mas natatanging mga banda, na humahantong sa mas mahusay na data para sa downstream na pagsusuri.
Kung mayroon kang mas mahusay na mga paraan upang ma-optimize ang eksperimento sa gel electrophoresis, maligayang pagdating upang talakayin sa amin!
Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ay dalubhasa sa pagmamanupaktura ng mga instrumento ng electrophoresis sa loob ng higit sa 50 taon gamit ang aming sariling propesyonal na teknikal na koponan at R&D center. Mayroon kaming maaasahan at kumpletong linya ng produksyon mula sa disenyo hanggang sa inspeksyon, at bodega, pati na rin ang suporta sa marketing. Ang aming mga pangunahing produkto ay Electrophoresis Cell (tangke/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System atbp. Nagbibigay din kami ng mga instrumento sa lab tulad ng PCR instrument, vortex mixer at centrifuge para sa laboratoryo.
Kung mayroon kang anumang plano sa pagbili para sa aming mga produkto, mangyaring huwag mag-atubiling makipag-ugnayan sa amin. Maaari kang magpadala sa amin ng mensahe sa email[email protected]o[email protected], o mangyaring tawagan kami sa +86 15810650221 o idagdag ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.
Mangyaring I-scan ang QR code upang idagdag sa Whatsapp o WeChat.
Oras ng post: Ago-20-2024