DNA Gel Electrophoresis: Pagsusuri ng Mga Genetic Fragment

Ang DNA gel electrophoresis ay isang pangkaraniwang molecular biology technique na ginagamit para sa paghihiwalay at pagsusuri ng mga fragment ng DNA batay sa kanilang mga sukat. Ang proseso ay nagsasangkot ng pag-load ng iba't ibang laki ng mga fragment ng DNA sa isang gel na gawa sa agarose, isang carbohydrate na matatagpuan sa pulang algae.

Paghahanda at paghahagis ng agarose gel

  1. I-dissolve ang agarose sa isang naaangkop na dami ng electrophoresis buffer. Ang konsentrasyon ng gel ay tinutukoy ng mass-to-volume ratio, tulad ng 1g ng agarose sa 100ml ng buffer para sa isang 1% gel.
  2. Painitin ang timpla sa isang microwave, paikutin ang lalagyan upang matiyak ang kumpletong pagkatunaw ng agarose.
  3. Magdagdag ng ethidium bromide sa solusyon ng gel sa panghuling konsentrasyon na 0.5mg/ ml. Ang ethidium bromide ay nag-intercalate sa pagitan ng mga katabing pares ng base ng DNA at naglalabas ng orange na fluorescence sa ilalim ng UV light. Tandaan na ang ethidium bromide ay isang carcinogen, kaya ang paghawak nito ay nangangailangan ng wastong mga hakbang sa kaligtasan tulad ng pagsusuot ng guwantes.
  4. Palamigin ang gel solution sa isang paliguan ng tubig upang maiwasan ang pag-warping ng gel tray dahil sa mataas na temperatura.
  5. Maglagay ng suklay sa gel solution para makabuo ng sample wells. Pumili ng mga suklay na angkop para sa dami ng sample ng DNA na iyong ilo-load. Ibuhos ang solusyon ng agarose gel satray ng gelat payagan itong patigasin sa temperatura ng silid.
  6. Kapag ang gel ay tumigas, alisin ang suklay. Kung hindi mo agad gagamitin ang gel, balutin ito ng plastic wrap at iimbak ito sa 4 ℃ hanggang kinakailangan.

Paghahanda at pagpapatakbo ng gel

Bago simulan ang electrophoresis, paghaluin ang sample ng DNA sa loading buffer. Ang loading buffer ay karaniwang anim na beses na mas puro at tumutulong sa sample na lumubog sa ilalim ng mga balon at subaybayan ang paggalaw sa panahon ng electrophoresis.

Itakda ang power supply sa tinukoy na boltahe.

Magdagdag ng sapat na electrophoresis buffer sa tangke ng gel upang masakop ang ibabaw ng gel.Siguraduhinang tamang koneksyon ng elektrod.

I-load ang sample ng DNA at mga marker ng molecular weight sa mga gel well.

I-on ang power supply para simulan ang electrophoresis.

Pagmamasid sa mga hiwalay na fragment ng DNA

Pagkatapos ng electrophoresis, patayin ang power supply at alisin ang gel.

Gumamit ng UV light source upang maipaliwanag ang gel; Lilitaw ang mga fragment ng DNA bilang mga orange fluorescent band.

Idokumento ang imahe ng gel upang pag-aralan ang pinaghiwalay na mga fragment ng DNA.

Pagkatapos ng eksperimento, tiyakin ang wastong pagtatapon ng gel at electrophoresis buffer, na sumusunod sa mga alituntunin sa laboratoryo. Palaging magsuot ng guwantes kapag humahawak ng mga gel at buffer na naglalaman ng ethidium bromide upang maprotektahan laban sa pagkakalantad sa mapanganib na sangkap na ito.

Ang DNA gel electrophoresis ay malawakang ginagamit sa molecular biology at genetics research para sa pagtatantya ng mga laki ng molekula ng DNA, paghihiwalay ng mga fragment ng DNA, pag-detect ng mga mutation ng gene, at DNA fingerprinting, bukod sa iba pang mga application. Ito ay isang simple at epektibong eksperimentong pamamaraan na tumutulong sa pag-unawa sa komposisyon at mga katangian ng mga sample ng DNA.

Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, isang propesyonal na tagagawa na tumutuon sa mga produktong electrophoresis sa loob ng 50 taon, ay nag-aalok ng hanay ng mga electrophoresis tank (chambers/cells) para sa gel electrophoresis, tulad ng horizontal electrophoresis tank (chambers/cells) para saDNAgel electrophoresis, at vertical electrophoresis tank (chambers/cells) para sa protein gel electrophoresis. Samantala, nagbibigay din ito ng iba't ibang uri ng electrophoresis power supply, cabinet dark box analyzer at UV transilluminator. Maaari mong piliin ang mga tangke ng electrophoresis ng Beijing Liuyi (mga silid/mga cell) upang sukatin ang bigat ng molekular ng RNA at upang paghiwalayin ang RNA na may iba't ibang laki para sa iyong lab.

Dito natin gagawinmagrekomendaisang uri ng horizontal electrophoresis tank (chamber/cell) modelDYCP-31DN upang gawin at patakbuhin ang gel.

1

Pagkatapos patakbuhin ang gel, maaari mong gamitin ang aming gel image at analysis system modelWD-9413Bupang obserbahan, pag-aralan at kumuha ng mga larawan para sa gel. Nag-aalok din ang Liuyi Biotech ng UV transilluminator (UV Analyzer) upang obserbahan ang gel. Mayroon kaming black-box type na UV transilluminator (UV Analyzer) na modeloWD-9403A,9403C,WD-9403F, modelo ng portable UV transilluminator (UV Analyzer).WD-9403Bat handhold UV transilluminator (UV Analyzer)WD-9403Epara piliin mo.

2

Ang Beijing Liuyi brand ay may higit sa 50 taong kasaysayan sa China at ang kumpanya ay maaaring magbigay ng matatag at mataas na kalidad na mga produkto sa buong mundo. Sa pamamagitan ng mga taon ng pag-unlad, ito ay karapat-dapat sa iyong pinili!

Naghahanap kami ngayon ng mga kasosyo, parehong OEM electrophoresis tank at mga distributor ay tinatanggap.

Kung mayroon kang anumang plano sa pagbili para sa aming mga produkto, mangyaring huwag mag-atubiling makipag-ugnayan sa amin. Maaari kang magpadala sa amin ng mensahe sa email[email protected]o[email protected], o mangyaring tawagan kami sa +86 15810650221 o idagdag ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.


Oras ng post: Aug-08-2023